绒毛膜癌耐药细胞系的建立及HIL-2基因转染后对其多药耐药性的逆转作用
发布日期： 2001-09-27
据《中华妇产科杂志》2001年9月36卷第9期报道
中国医学科学院北京协和医院妇产科崔竹梅等，为观察人白细胞介素2(HIL-2)基因转染后对绒癌耐药细胞耐药性的逆转作用，采用间歇诱导的方法，用足叶乙甙(VPl6)诱导绒癌细胞系JEG-3，建立耐药细胞系，检测其对多种化疗药物耐药指数，多种耐药基因包括肺耐药蛋白(LRP)，多药耐药相关蛋白(MRP)，谷胱甘肽转移酶(GST-π)，二氢叶酸还原酶(DHFR)和多药耐药基因(MDR-1)的mRNA表达情况。用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术克隆人HIL-2基因，将HIL-2基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中，提取质粒，通过阳离子脂质体将HIL-2基因转染绒癌耐药细胞系，用新霉素(G418)筛选含HIL-2DNA片段的单个细胞克隆，检测转染HIL-2基因后细胞耐药指数的变化，测定转染后细胞HIL-2和多种耐药基因mRNA的表达。
结果显示：用VP16采用间歇诱导法，成功建立绒癌的VPl6耐药细胞系JEG-3/VPl6，并检测出MDRl mRNA表达。转染HIL-2基因后绒癌细胞中检测出HIL-2 mRNA表达，转染HIL-2基因的细胞耐药指数降低，JEG-3/VPl6转染pcDNA3.1(+)-H1L-2细胞对VPl6的耐药指数由38.7降低到6.0和6.1，对MTX耐药指数由14.5降低到2.6和2.5，对KSM的耐药指数由13.0降低到2.0和2.0，说明JEC-3/VPl6细胞转染pcDNA3.1-HIL-2对VPl6耐药性明显降低，同时也逆转了对其它药物的耐受性。MDR-1 mRNA表达转阴。作者认为，HIL-2基因转染后可通过调节MDR-1的表达，从而逆转绒癌耐药细胞系的耐药性。