Group  []   G1  〖〗 S  〖〗   G2 Control 〖〗    68.2±3.9 〖〗 12.2±3.1  〖〗 19.6±2.8 ACh  (10 μmol/L) 〖〗    93.3±4.1** 〖〗   1.6±0.7**  〖〗   5.1±2.0**   ACh+Atro (10 μmol/L) 〖〗  69.3±3.1   〖〗  13.6±2.9 〖〗  17.1±3.4ACh+Tubo (10 μmol/L)   〖〗   91.0±7.5**  〖〗 3.1±1.2**  〖〗 5.9±2.3**   Carbachol  (10 μmol/L) 〖〗  90.3±6.2** 〖〗  1.2±0.6** 〖〗  8.5±3.6****P<0.01  vs  groups control and ACh+Atro. n=3.

3讨论

人垂体前叶至少有6种内分泌细胞, 每一种分泌细胞都可合成和分泌多种旁分泌因子作用于本身或其他细胞, 同时又作为靶细胞接受本身和其他细胞的旁分泌因子的作用［2,10］。在垂体前叶发现的活性物质有几十种之多, ACh便是其中之一。由于ACh大部分是由胆碱能神经细胞合成和释放, 正常情况下释放后在局部起作用, 然后由乙酰胆碱酯酶迅速水解或回摄, 很难作远距离扩散。而且, 目前尚未发现垂体前叶有直接的胆碱能神经支配的证据, 因此, 垂体前叶细胞或垂体腺瘤细胞是否能够合成ACh, 是ACh在垂体前叶能否发挥作用的一个关键问题。由于ChAT是合成ACh的限速酶, 因此, ChAT的存在与否则是表明垂体前叶细胞能否合成与释放ACh的关键。

既往研究表明, 多种动物的正常垂体前叶细胞及肿瘤细胞都可以合成并分泌ACh。正常的促肾上腺皮质激素细胞及其肿瘤细胞均能合成并释放乙酰胆碱［3］。大鼠GH3细胞也能释放ACh, 当对实验中的GH3细胞停止灌流时, GH3细胞释放的ACh会逐渐升高并表现出对GH3细胞的影响, 而一旦加入阿托品后ACh的影响则立即消失［4,5］。Strien在对蟾蜍的研究中发现促黑素细胞内均含有ChAT, 可在体外合成ACh, ACh能增加促黑素细胞的活性［11］。我们应用免疫组织化学的方法, 表明在人的正常垂体前叶细胞及人无功能瘤、催乳素瘤和生长激素瘤等三种垂体腺瘤细胞的胞浆内均明显存在ChAT阳性染色。说明ACh可以在垂体前叶细胞内和/或垂体腺瘤细胞内合成并释放, 提示ACh能够在垂体前叶内和/或垂体腺瘤内以旁分泌或自分泌的形式起作用, 影响着垂体前叶细胞的分泌功能以及细胞的增殖与分化。

尽管ACh是第一个被证明的神经递质, 但由于定量和组织化学显示较困难, 关于ACh的研究远不如单胺类递质。早在80年代初就有学者开始研究ACh与腺垂体功能的关系, 但到目前为止, ACh作用的研究基本限于ACh对垂体分泌功能的影响, 即便如此, 也尚未取得一致性的认识。Wood［6］证明, ACh能够增加培养的牛腺垂体细胞内的钙浓度, 进而增加生长激素(growth hormone, GH)的分泌, Pinter［8］却观察到, ACh对新生大鼠(<3周)垂体分泌GH有刺激作用, 但对成年大鼠没有作用。关于ACh对催乳素分泌的影响同样看法不一致［7］。这些结果的差异可能与实验方法不一及种属差异有关。而ACh对垂体前叶细胞增殖代谢的影响更是不清楚, 仅Fedotov［9］观察了ACh对不同年龄组大鼠垂体细胞总蛋白及DNA合成的影响。 他们发现, ACh可减少青春期大鼠垂体细胞总蛋白合成, 但对新生鼠无影响, 而且对新生鼠垂体细胞DNA合成亦无影响。近来资料表明, 鼠垂体前叶细胞表面存在着功能性的M型胆碱能受体［12］, 该受体可以调节GH3细胞的Ca2+的振荡频率［13］, 提示ACh能够以旁分泌或自分泌的方式作用于垂体前叶细胞。但到目前为止, ACh对人垂体腺瘤细胞的影响尚未见报道。

    本实验发现, ACh对三种垂体腺瘤: 催乳素瘤、无功能瘤和生长激素瘤都具有明显的抑制细胞增殖代谢的作用, 依ACh作用浓度的不同(0.1~10 μmol/L), 抑制的程度也不同, 从10％左右到近40％, 呈现明显的剂量依赖效应。ACh＋Atropine (10 μmol/L)组中, ACh的抑制作用消失, 而ACh+Tubocurarine (10 μmol/L)组中, ACh的抑制作用仍然存在, 表明ACh对垂体腺瘤细胞增殖的抑制作用可被乙酰胆碱M受体拮抗

上一页  [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] 下一页