2005年07月26日 中华肿瘤杂志2005 Vol.27 No.4 P.213-215 3

(武汉)为了研究促胃液素对人结肠癌细胞侵袭力的影响，以及促胃液素-促胃液素受体-黏着斑激酶(FAK)信号通路在此过程中的作用，研究者使用促胃液素受体的真核表达载体pCR3.1/GR转染人结肠癌细胞株Colo320(Colo320/GR)，使其高表达促胃液素受体，达到上调信号通路的作用；使用反义寡核苷酸阻断FAK的表达，达到下调信号通路的作用。使用递增剂量的促胃液素(0，0.1，1，10，100 nmol/L)刺激Colo320和Colo320/GR细胞，用Boyden小室检测各组细胞侵袭力变化； 使用免疫沉淀和蛋白质印迹法，检测细胞FAK第397位酪氨酸(tyr-397)磷酸化的状况。使用免疫沉淀、蛋白质印迹法和Boyden小室法检测正常细胞、Colo320/GR、转染反义寡核苷酸组细胞和对照组细胞在接受促胃液素刺激前后，细胞侵袭力和FAK tyr-397磷酸化的变化。结果促胃液素能够增强Colo320和Colo320/GR细胞侵袭力和FAK tyr-397磷酸化，具有剂量依赖性。促胃液素受体表达增加可以增强细胞的侵袭力和FAK tyr-397磷酸化。使用FAK反义寡核苷酸对FAK的表达进行阻断后，促胃液素的作用明显下降。可见促胃液素可有效地增强结肠癌细胞的侵袭力，其作用是通过促胃液素-促胃液素受体-FAK通路实现的。