BII 017
三氧化二砷诱导人类大肠癌细胞凋亡
及其分子机制的研究
刘 琳1 邱少敏2 赵 伟2 沈 玲2 秦叔逵3 陈惠英3
210009 1东南大学附属中大医院肿瘤科
210003 2南京市肿瘤医院
210002 3解放军八一医院
目的：明确三氧化二砷(As2O3)注射液对人类大肠癌细胞株的诱导凋亡作用,并探讨其分子机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、AO/EB荧光染色法、透射电镜观察、DNA电泳、流式细胞术法及免疫组化等方法，系统地观察了As2O3注射液对体外培养的人类大肠癌细胞株LoVo和CoLo-320的生长活力、细胞凋亡、细胞周期及其相关基因表达的影响。结果：As2O3注射液能显著地抑制人大肠癌细胞LoVo和CoLo-320的生长，用药后诱导其出现了典型的细胞凋亡的形态学和生化学改变，癌细胞bcl-2基因表达明显下降， bax、Fas和P53基因表达显著增强。结论：As2O3注射液对人类大肠癌细胞具有显著的诱导凋亡作用，这一作用受到多种基因的调控,由此为应用As2O3治疗治疗大肠癌提供了可靠的实验依据。
BII 018
胃癌发生过程中微卫星不稳定性的研究
刘 平1 束永前1 张小勇2 邵 耘2
210029 1南京医科大学第一附属医院肿瘤科
2南京医科大学第一附属医院消化科
目的：胃黏膜肠上皮化生和异型增生是胃癌的癌前病变，胃癌的发生可能是胃黏膜癌前病变发生和发展过程中的一系列基因变异累积引起胃黏膜正常细胞发生恶性转化所致。微卫星不稳定性(MSI)是DNA基因组不稳定的重要标志，研究胃癌和癌前病变组织MSI的存在情况，有助于从基因组不稳定的角度探讨胃癌可能的发生机制以及MSI在胃癌发生过程中的可能作用。方法：对30例胃癌、30例异型增生、40例肠上皮化生组织标本分别提取病变及相应正常组织的DNA，胃癌按1987年全国肿瘤会议PTNM分期标准分期，肠上皮化生及异型增生组织按WHO标准分轻、中、重度。采用美国国家癌症学会(NCI)推荐用于胃癌MSI检测的5个位点(BAT-25、BAT-26、D5S346、D17S250、D2S123),应用银染PCR- CP技术检测上述5个微卫星位点的不稳定性。 结果：30例胃癌中有7例表现1个或1个以上位点的不稳定性，MSI的发生率为23.3%，胃窦癌MSI的发生率显著高于贲门癌(P=0.044)；MSI胃癌与M 胃癌在性别、年龄、细胞分化程度、淋巴结转移及TNM分期方面无统计学差异。30例异型增生组织中9例检出MSI，阳性率30%；MSI与异型增生的程度无明显关系。40例肠上皮化生组织8例出现MSI，阳性率为20%，且全部出现在中度以上肠化生组织中。结论：胃癌癌前病变组织MSI的存在可能是胃癌多步骤发生过程中的早期分子事件，亦可能是胃癌发生发展中的重要环节之一，对胃黏膜癌前病变组织MSI的检测和分析将有助于探索胃癌发病机制以及预测胃癌发生的危险性。
BII 019
氟脲嘧啶脂质体注射液取代5-氟脲嘧啶注射液的
联合化疗治疗晚期胃癌近期疗效的评价
刘 巍 吕雅蕾 王力利
050011 河北医科大学第四医院肿瘤内科
目的：探讨氟脲嘧啶脂质体取代5-氟脲嘧啶的联合化疗方案治疗晚期胃癌的近期疗效及毒副作用。方法：选择晚期及根治术后复发转移的病人148例，随机分成氟脲嘧啶脂质体及5-氟脲嘧啶组，以LFAM及 HDLF方案进行全身静脉交替化疗 ，28天为1个周期，每例均完成至少4个周期的化疗。结果：两组均无完全缓解的病例， 氟脲嘧啶脂质体组总有效率为60.4%，5-氟脲嘧啶组总有效率为45.6%，主要毒性反应为轻度的消化道反应和骨髓抑制。结论：氟脲嘧啶脂质体注射液在某些联合化疗方案中可取代5氟脲嘧啶注射液而获得较好的疗效。
BII 020
人肝癌细胞系FHCC-98的建立及其生物学特性鉴定
楼朝阳1 冯英明1 宋 杨1 闵 婕1 马宁强1 骞爱荣2 商 澎2 陈志南2
710038 1第四军医大学唐都医院肿瘤科
2第四军医大学细胞生物学教研室
目的：利用人肝癌组织进行体外培养，建立一株人肝癌细胞系FHCC-98，并对其生物学特性进行观察. 方法：选择新鲜的人肝癌组织标本，将分离的瘤组织制成细胞悬液，用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液建成该细胞系，采用光镜和电镜观察细胞的形态结构；应用MTT法和软琼脂克隆形成实验测定该细胞系的生长特性；采用流式细胞仪和检测染色体进行遗传学分析；免疫组化检测甲胎蛋白、细胞角蛋白和肝癌转移相关因子HAb18G/CD147的表达,；ConA凝集试验观察细胞生长的凝集性；聚丙烯酰胺凝胶电泳测定乳酸脱氢酶同工酶含量百分比；裸鼠皮下接种观察该细胞系的成瘤性；透射电镜检测细胞系有无支原体污染 。结果：FHCC-9细胞以多角形、多边形为主，占95%以上，少数为长条形及圆形。细胞在高密度时 呈重叠及堆积生长，细胞表面有丰富微绒毛，细胞间有桥粒紧密连接，有少量连接复合体。细胞间有形成腺结构及条索结构倾向，可形成类似胆小管样结构。细胞质丰富，有大量糖原颗粒形成糖原湖样结构。线粒体、粗面内质网较发达，有丰富的游离核糖体。细胞核增大，核浆比例增大，核不规则，有多核细胞，核膜明显凹陷，核仁1～5个不等。核内以常染色质为主，异染色质较少，可见有核分裂像，偶见异常核分裂；该细胞系群体倍增时间为21.36小时，能在软琼脂上生长，为四倍体细胞，染色体以三倍体为主；免疫组化检测细胞角蛋白和阳性，AFP阴性， HAb18G/CD147高度表达；细胞在ConA作用下发生凝集；裸鼠接种成瘤率为100%；无支原体污染。 结论： FHCC-98细胞来源于人肝癌组织，和其他人肝癌细胞系相比，有其不同的特征，主要表现为：①生长迅速，贴壁快，细胞倍增时间短，为21.4h.②HAb18G/CD147 强阳性，AFP为阴性。③ 细胞间有形成腺结构及条索结构倾向，可形成类似胆小管样结构。说明细胞经过传代，仍保留来源组织的一些特性。④裸鼠成瘤性好，且肿瘤随着时间生长迅速。⑤生物学特性稳定，对不同代细胞的生长特性、肿瘤标记物和同工酶等进行多次检测，未显示有明显变化。因此，FHCC-98是一株新的人肝癌细胞系，可作为人肝细胞癌的研究。
BII 021
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