程 旭 陈子兴 王 玮 傅建新 岑建农 姚 利
215000苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所
目的：探讨在各型急性白血病患者中，白血病细胞中端粒长度、端粒酶活性、hTERT及TRF1的表达以及它们之间的关系，并与临床特征做相关分析。方法：30例初治急性白血病患者均系2001年11月到2002年9月间于苏大附一院门诊就诊患者或血液科住院病人，急性非淋巴细胞性白血病23例；急性淋巴细胞性白血病7例，其中。对照组11例，其中正常7例，缺铁性贫血4例。采用端粒酶PCR-ELISA半定量法对病例及对照的骨髓单个核细胞的端粒酶活性进行了检测，采用RT-PCR法对其进行hTERT及TRF1基因mRNA的表达检测，并同时采用Southern bloting法对患者及对照进行了端粒长度的检测。数据用均数加减标准差显示，采用t检验及相关回归分析。结果： 急性白血病患者平均端粒酶活性为0.69±0.33，而对照组平均端粒酶活性为0.26±0.14两组区别具有显著意义(P＜0.01)。30例急性白血病患者中24例检测到了hTERT mRNA的表达，平均hTERT表达水平为0.47±0.37，而对照组有只有两例检测到了hTERT mRNA的表达，平均hTERT表达水平为0.11±0.08两组区别具有显著意义(P＜0.01)。hTERT的表达与端粒酶活性呈正相关(P＜0.01)。30例急性白血病患者有23例检测到了TRF1表达，平均TRF1表达水平为0.45±0.25，而对照组均有TRF1表达，平均TRF1表达水平为0.67±0.27两组区别具有显著意义(P＜0.05)。 急性白血病患者的平均端粒长度为6.1±1.9Kb，对照组9.5±1.4Kb，两组区别具有显著意义(P＜0.01)。 如将端粒长度低于对照组均数减去两倍的标准差的白血病患者定义为端粒长度缩短，则30例患者中有19例端粒长度缩短，范围为：3.5-6.6Kb；有11例患者端粒长度无明显缩短，范围为：6.7-10Kb。端粒长度较短的患者的平均端粒酶活性0.80±0.27，而端粒长度较长的患者的平均端粒酶活性为0.50±0.35、两组区别具有显著意义(P<0.01)。而hTERT及TRF1的表达水平在这两组分别为0.56±0.38、0.52±0.24和0.31±0.32、0.34±0.24，相对于端粒长度较长的患者，端粒长度较短的患者的hTERT及TRF1表达水平有升高趋势(p＝0.08、p＝0.06)。结论：急性白血病患者端粒酶活性及hTERT表达明显高于对照组。hTERT mRNA的表达与端粒酶的活性呈正相关，表明表明急性白血病细胞中端粒酶的异常激活可能是急性白血病的重要发病机制之一，而hTERT的异常表达可能是急性白血病患者端粒酶激活的重要因素之一。
CIII 009
p73基因在K562细胞凋亡前后的表达
樊光华
江西省肿瘤医院
目的：探讨甲氨喋呤(MTX)和干扰素-α-2b(IFN-α-2b)诱导人慢性粒细胞白血病急变细胞株(K562)凋亡的作用及凋亡相关基因p73 mRNA在凋亡前后表达的变化。方法：采用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测K562细胞凋亡，采用半定量逆转录PCR方法(RT-PCR)检测p73 mRNA的表达。结果：4μg/ml MTX和600IU/ml IFN-α-2b分别作用于K562细胞6、12和24小时，通过DNA琼脂糖凝胶电泳可见清晰的梯形条带。流式细胞仪检测：MTX作用细胞6、12和24小时，细胞凋亡率(AR)分别为：5.15%、14.70%和35.49%；而IFN-α-2b作用6、12和24小时，AR分别为2.33%、11.90%和35.15%。对照组AR分别为0.93%和1.09%。半定量RT-PCR测定表明：IFN-α-2b作用24小时组p73 mRNA表达较对照组下调(0.43±0.05/0.66±0.11,p<0.05)，其余各组无明显变化。结论：MTX、IFN-α-2b可诱导K562细胞凋亡；在MTX、IFN-α-2b诱导K562细胞凋亡的早期，p73 mRNA表达无明显变化；IFN-α-2b作用24小时，p73mRNA表达下调。
CIII 010
吡喃阿霉素联合方案治疗
难治性急性非淋巴细胞白血病临床分析
方炳木 李琳洁 刘伟红 金阳缙
323000 浙江丽水市中心医院血液科
目的：观察吡喃阿霉素联合足叶乙甙、阿糖胞苷治疗难治性急性非淋巴细胞白血病疗效。方法：按入院次序随机分成TEA和MEA组各自使用两疗程后，作疗效和毒副作用比较。结果：TEA组CR51％，PR20％，RR71％；MEA组CR47％，PR24％，TR71％。结论：TEA方案治疗难治性ANLL疗效与MEA相当，可作为首选抗耐药方案使用。
CIII 011
实时定量PCR分析CML患者胸腺近期输出功能
实时定量PCR分析CML患者胸腺近期输出功能
耿素霞1 李扬秋1 杨力建1 陈少华1 韩素芳1 周羽竝2 陈青山3
510632 1暨南大学医学院血液病研究所 2生化教研室 3流行病学教研室
目的：了解慢性粒细胞白血病(CML)患者 CD3 、CD4 和CD8 细胞中T细胞受体重排删除DNA环(TRECs)的含量，从而推测CML患者的胸腺近期输出功能。方法：利用实时定量PCR(TaqMan)方法检测8例CML患者外周血单个核细胞、3例CML患者CD4 和CD8 细胞中TRECs的水平。并根据外周血中CD3阳性率计算CD3 细胞中TRECs水平。9例正常人外周血作为对照。结果：CML患者中TRECs含量为0.1±0.22/1000 T细胞，明显低于正常人TRECs水平(6.84±4.71/1000 T细胞，p<0.01)。其中5例患者外周血单个核细胞中未能检测到TRECs，经分选CD4 和CD8 细胞后，2例可以检测到低水平的TRECs。结论：本研究首先报道了CML患者TRECs水平情况，结果显示其胸腺近期输出功能明显降低。