侯淑玲 张巧花 王 军 贺建霞 杨 斌 归 薇 郑玉萍
030013 山西省肿瘤医院血液内科
目的：纤维蛋白溶解与恶性肿瘤的生长、迁徙的关系越来越受到重视。D—二聚体(D-dimer)是纤维蛋白溶解酶诱导的稳定纤维蛋白的一种特异性溶解产物。本文随机对60例非霍奇金淋巴瘤(NHL)D—二聚体水平进行测定分析，旨在探讨纤溶与NHL发生、发展及预后的关系，并进一步进行靶向治疗。方法：抽空腹静脉血抗凝，采用ELISA方法定量测定患者血浆D—二聚体含量。其中Ⅰ、Ⅱ期17人，Ⅲ、Ⅳ期43人。惰性淋巴瘤人4人，进展性淋巴瘤人41，高度进展性15人。分析NHL分型分期疗效及预后与D—二聚体水平的关系。结果：NHL患者D—二聚体阳性占15%，均为Ⅲ、Ⅳ期患者。D—二聚体水平随着治疗无效、病情复发加重或死亡，而升高。D—二聚体水平与NHL恶性程度无关。结论：D—二聚体不仅是纤维蛋白溶解的特异产物，是诊断DIC的实验室指标，而且可作为NHL疗效判断及判断预后的指标。
CIII 013
不典型真性恶性组织细胞病1例并文献复习
黄泛舟
100029 北京中日友好医院血液科
目的：探讨恶性组织细胞病的诊治。方法：骨髓细胞学检查，骨髓活检，组化染色，骨髓流式细胞术检查，融合基因。结果：流式细胞术检查恶组细胞位于有核红区域，所查的髓系、T、B淋巴系、红系、巨核系等标记均阴性。 M/ALK等32种融合基因检查均阴性。血生化检查AFP显著升高。临床上无淋巴结和脾肿大。结论：恶性组织细胞病的诊断必须除外诊断。
CIII 014
B-ALL病人 TCR Vβ基因谱系和克隆性分析
黄梅娟 李扬秋 陈少华 杨力建 周羽竝 张 涛
510632 暨南大学医学院血液病研究所
目的：了解B-ALL病人外周血T细胞的TCR Vβ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法：利用RT-PCR方法扩增13例初发未治B-ALL病人外周血单个核细胞中24个TCR Vβ基因的互补决定区3(CDR3)，PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果：13例B-ALL病人分别表达2～18个Vβ亚家族。13例病人均存在1个或多个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞，增殖形式包括寡克隆及寡克隆增殖趋势、双克隆和单克拢Vβ21和 Vβ23亚家族出现克隆增殖性T细胞的频率较高。结论：B-ALL病人外周血T细胞的TCR Vβ谱系呈现优势利用的特点，并存在克隆性增殖的T细胞，这可能是机体对白血病相关抗原产生的特异性免疫反应；Vβ21和 Vβ23亚家族T细胞发生克隆增殖改变的趋向性比较明显，可能与B-ALL相关抗原刺激有关。
CIII 015
环腺苷酸信号传导途径与
早幼粒白血病细胞耐维甲酸的实验研究
贾培敏 窦爱霞 朱 琦 赵 倩 吴 文 童建华
200025 上海瑞金医院血液学研究所
应用全反式维甲酸(ATRA)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)目前已成为诱导分化疗法的典范。但值得注意的是，相当数量的APL患者会在完全缓解后短期内复发，这是因为诱导分化治疗并不能彻底清除白血病细胞克隆，而这些残余的白血病细胞往往对维甲酸具有耐药性，患者一旦复发，则会失去对ATRA的反应性。因此多年来探讨APL细胞对ATRA产生耐药的分子机制一直是国内外研究的热点之一。近年来，越来越多的证据表明细胞分化成熟是细胞内多条信号途径相互协同作用的结果，维甲酸以外的其它信号传导途径的异常被认为可能是诱发APL细胞耐药的重要机制之一。环腺苷酸(cAMP)作为细胞内信息传递的第二信使，在造血细胞的增殖、分化和凋亡过程中起着重要作用。本研究中我们以ATRA敏感及耐药的APL细胞株 4和 4-R1为模型，分别检测了两种细胞在维甲酸处理前后cAMP含量的变化，结果发现， 4细胞在经ATRA处理10分钟后细胞内的cAMP水平即会有明显的上升，而 4-R1细胞内cAMP水平则无明显变化。这一现象表明细胞内cAMP的含量在ATRA诱导APL细胞分化过程中起着重要的作用。那么，是什么原因使得 4和 4-R1两株细胞经ATRA处理后cAMP的水平有显著差异呢？我们又进一步通过改变腺苷酸环化酶(AC)和磷酸二酯酶(PDE)的活性对其中的机制进行了分析研究。我们分别应用AC和PDE的拮抗剂和激动剂，通过观察细胞形态、表面分化抗原以及对四氮唑蓝的还原能力的改变，来探讨AC和PDE的活性变化在ATRA诱导APL细胞分化中的作用。我们发现，AC抑制剂SQ22536能明显阻断ATRA对 4细胞的诱导分化作用；而在 4-R1细胞中，AC激活剂Forskolin能协同ATRA诱导细胞终末分化。PDE的特异激活剂P2277和拮抗剂IBMX对ATRA的作用则没有明显影响，表明AC的活化对ATRA的诱导分化作用至关重要。由此我们推断在 4-R1细胞中腺苷酸环化酶的激活过程可能存在障碍，导致cAMP的合成无法达到细胞分化所需水平，造成cAMP信号传导途径发生异常，不能与ATRA信号协同作用。需要指出的是 4-R1细胞中腺苷酸环化酶本身并无缺陷，Forskolin作为AC特异激活剂进入 4-R1细胞内，可以使AC活化，促进cAMP合成进而活化蛋白激酶PKA，PKA通过磷酸化修饰方式可以改变多种信号通路的关键分子的活性，参与ATRA诱导的细胞分化进程，逆转 4-R1细胞对ATRA的耐药性。我们的研究表明，阻断APL细胞内腺苷酸环化酶的活化，将抑制cAMP-PKA信号途径，影响 4细胞对ATRA的反应性。相反，恢复腺苷酸环化酶的正常激活则可克服 4-R1细胞对ATRA的耐药。本研究结果为临床上对APL患者的治疗，尤其是对复发耐药患者的治疗开辟了新的治疗思路，也为cAMP在临床应用提供了理论和实验基矗